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CERO 生物反应器|实现 iPSC 多谱系细胞规模化可扩展扩增

时间:2026-06-24来源 :点击次数:0次

导语

诱导多能干细胞(iPSC)是药物毒理测试、器官再生、细胞治疗的核心研究工具,但传统二维培养模式,存在产量低、批次差异大、难以放大等痛点,严重限制下游心脏、神经、肝脏等多谱系衍生物研发落地。OMNI Life Science(OLS)带来CERO 3D悬浮培养生物反应器,一套完整可扩展培养方案,完美解决 iPSC 大规模扩增难题,助力干细胞科研工业化!

一、行业痛点:传统 iPSC 培养,放大难、稳定性差

  1. 2D 平板培养操作繁琐,人工成本高,细胞扩增上限极低,无法满足毒理高通量筛选、动物替代模型等大批量样本需求;
  2. 单细胞传代易发生细胞凋亡,不添加 ROCK 抑制剂时细胞难以存活,细胞团块形态不均一,分化一致性差;
  3. 放大过程工艺断层,实验室小试成果无法平稳转化至中试、规模化生产,批次重复性差。

针对以上难题,Keong Kwok 团队 2022 年发表于Reprod Toxicol的研究,完整验证了 CERO 生物反应器搭配 3D 悬浮体系,可稳定、规模化扩增 iPSC 及其多谱系衍生物。

二、CERO 3D 悬浮生物反应器:两套成熟扩增工艺,适配不同实验需求

整套标准化工作流:iPSC 制备→接种→反应器培养→收获→冻存复苏,全程闭环可放大,支持重复传代,工艺可直接放大至生物反应器量产。

“在 3D 培养条件下培养和扩增 iPSC。A:3D 悬浮培养的工作流程选项。A1:iPSC 团块接种在 Matrigel™ 包被的藻酸盐微载体上。A2:将 iPSC 单细胞接种到含有 10 µM Y27632 的培养基中的 Matrigel™ 包被的藻酸盐微载体上。A3:iPSC 单细胞悬浮液在 ROCK 抑制剂 Y-27632 支持下形成聚集体。B:在 Matrigel™ 包被的藻酸盐微载体 (MC) 上培养为团块和单细胞以及聚集体的细胞形态。 细胞系 UKBi005-A 用于微载体方法,细胞系 BIONi010-C 用于聚集体方法。 比例尺 = 500 µm。

方案 1:微载体悬浮培养(适配细胞系 UKBi005-A)

采用 Matrigel 包被藻酸盐微载体(MC),分两种接种模式:

✅ A1 团块接种:无需解离为单细胞,操作简单,适合保守传代;

✅ A2 单细胞接种:添加 10μM ROCK 抑制剂 Y-27632,单细胞贴附微载体均匀增殖,细胞均一性大幅提升。培养第 4 天即可形成饱满、形态统一的细胞球,适合大批量种子细胞扩增。

方案 2:悬浮聚集体培养(适配细胞系 BIONi010-C)

A3 工艺:单细胞悬液添加 ROCK 抑制剂,无需微载体,直接在 CERO 反应器内自主形成细胞聚集体,省去微载体成本,操作更简洁,适合快速扩增、定向诱导分化(心脏、神经、肝细胞谱系)。

显微镜结果直观验证(标尺 500μm):

  • 无 ROCK 抑制剂:单细胞大量死亡,仅零散不规则团块;
  • 添加 ROCK 抑制剂 + 微载体:单细胞均匀附着,细胞球大小均一;
  • 抑制剂悬浮聚集体:纯悬浮球体,无载体杂质,下游分化更纯净。

三、CERO 反应器核心优势,科研 / 产业化双适配

  1. 真正可扩展,无缝放大从小规模筛选台式设备到规模化生物反应器,培养体系、培养基、工艺参数完全通用,实验室数据直接平移放大,不用重新优化工艺,大幅缩短研发周期。
  2. 多谱系通用,全能干细胞平台稳定扩增 iPSC 干细胞本体,后续可定向分化心脏、神经、肝脏细胞,搭建稳健标准化分化流程,为体外毒性测试、疾病模型、细胞治疗提供足量稳定细胞原料。
  3. 降低人工误差,批次高度稳定3D 悬浮自动化培养,替代传统多层平板人工操作,减少人为污染与操作差异,细胞增殖状态、分化效率批次重复性显著优于 2D 培养。
  4. 两种工艺自由选择,适配不同研究方向微载体体系:细胞附着稳定,扩增倍数更高,适合种子库大规模制备;悬浮聚集体体系:无载体残留,纯化简单,适合类器官、定向分化研究。
结 语

干细胞研究早已告别小剂量 2D 培养时代,规模化、标准化、自动化是必然趋势。OLS CERO 3D 悬浮生物反应器一站式解决 iPSC 扩增、多谱系分化放大难题,不管是高校实验室基础研究,还是药企细胞毒理筛选、细胞治疗中试开发,都能提供成熟落地的细胞扩增解决方案。

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