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诱导多能干细胞(iPSC)是药物毒理测试、器官再生、细胞治疗的核心研究工具,但传统二维培养模式,存在产量低、批次差异大、难以放大等痛点,严重限制下游心脏、神经、肝脏等多谱系衍生物研发落地。OMNI Life Science(OLS)带来CERO 3D悬浮培养生物反应器,一套完整可扩展培养方案,完美解决 iPSC 大规模扩增难题,助力干细胞科研工业化!
针对以上难题,Keong Kwok 团队 2022 年发表于Reprod Toxicol的研究,完整验证了 CERO 生物反应器搭配 3D 悬浮体系,可稳定、规模化扩增 iPSC 及其多谱系衍生物。
整套标准化工作流:iPSC 制备→接种→反应器培养→收获→冻存复苏,全程闭环可放大,支持重复传代,工艺可直接放大至生物反应器量产。
“在 3D 培养条件下培养和扩增 iPSC。A:3D 悬浮培养的工作流程选项。A1:iPSC 团块接种在 Matrigel™ 包被的藻酸盐微载体上。A2:将 iPSC 单细胞接种到含有 10 µM Y27632 的培养基中的 Matrigel™ 包被的藻酸盐微载体上。A3:iPSC 单细胞悬浮液在 ROCK 抑制剂 Y-27632 支持下形成聚集体。B:在 Matrigel™ 包被的藻酸盐微载体 (MC) 上培养为团块和单细胞以及聚集体的细胞形态。 细胞系 UKBi005-A 用于微载体方法,细胞系 BIONi010-C 用于聚集体方法。 比例尺 = 500 µm。”
采用 Matrigel 包被藻酸盐微载体(MC),分两种接种模式:
✅ A1 团块接种:无需解离为单细胞,操作简单,适合保守传代;
✅ A2 单细胞接种:添加 10μM ROCK 抑制剂 Y-27632,单细胞贴附微载体均匀增殖,细胞均一性大幅提升。培养第 4 天即可形成饱满、形态统一的细胞球,适合大批量种子细胞扩增。
A3 工艺:单细胞悬液添加 ROCK 抑制剂,无需微载体,直接在 CERO 反应器内自主形成细胞聚集体,省去微载体成本,操作更简洁,适合快速扩增、定向诱导分化(心脏、神经、肝细胞谱系)。
显微镜结果直观验证(标尺 500μm):
干细胞研究早已告别小剂量 2D 培养时代,规模化、标准化、自动化是必然趋势。OLS CERO 3D 悬浮生物反应器,一站式解决 iPSC 扩增、多谱系分化放大难题,不管是高校实验室基础研究,还是药企细胞毒理筛选、细胞治疗中试开发,都能提供成熟落地的细胞扩增解决方案。
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